Tesis profesional presentada por Andrés Sánchez Quinto

Licenciatura en Biología. Departamento de Ciencias Químico Biológicas. Escuela de Ciencias, Universidad de las Américas Puebla.

Jurado Calificador

Presidente: Dr. José Daniel Lozada Ramírez
Vocal y Director: Dr. José Luis Sánchez Salas
Secretario: Mtro. Jerónimo García Guzmán

Cholula, Puebla, México a 15 de mayo de 2010.

Resumen

It is important to understand how B. subtilis grows in harsh conditions to demonstrate the probability of microbial growth in low O2 conditions, even in anoxia and low atmospheric pressure. In this study we used three strains of B.subtilis where two expressed the gene vgb of Vitreoscilla stercoraria using plasmids pUB110::sspE::vgb (multicopy), pTrp::vgb (with one integrative copy) which affects the growth of B . subtilis and a third one wild-type. Strains were inoculated in nephelometric flasks with 2xYT medium. Bacterial growth of the three strains of B.subtilis was measured by the absorbance values obtained from a SPECTRONIC 20D + spectrophotometer (Milton Roy) at 37 ° C in five conditions: aerobic, microaerophilic, vacuum, anaerobiosis and anaerobiosis + vacuum. The strains grew in all different conditions however, the best growth was observed from the aerobic and microaerophilic conditions. The strain with plasmid pUB110:: sspE::vgb (multicopy) increased in greater proportion in the vacuum conditions and in anaerobiosis. The wild type strain with the plasmid pUB110:: sspE::vgb had a better growth with less lag phase in the absence of oxygen. However, the strain with the plasmid pTrp: vgb grew poorly, probably due to fact that when this plasmid becomes integrated in the bacterial chromosome, disrupts the gene for starch utilization, affecting in some way growth and development. Growth rate (k), generation time (g) and statistics analysis where corroborated in the logarithmic phase of each bacterial growth curve. We conclude that since B.subtilis can growth under extreme environmental situations, including anoxic conditions, could offer the possibility to be used as a starter to colonize neighbor planets in our solar system with low atmospheric pressures provided that necessary nutrients are provided. Additionally, recent evidence of water in Mars suggests that this could be a possibility in the next decades.

Índice de contenido

Agradecimientos (archivo pdf, 22 kb)

Índices (archivo pdf, 28 kb)

Glosario (archivo pdf, 18 kb)

Capítulo 6. Resumen (archivo pdf, 14 kb)

Capítulo 7. Introducción (archivo pdf, 306 kb)

  • 7.1 Antecedentes

Capítulo 8. Justificación (archivo pdf, 12 kb)

Capítulo 9. Hipótesis (archivo pdf, 12 kb)

Capítulo 10. Objetivos (archivo pdf, 16 kb)

  • 10.1 Objetivo General
  • 10.2 Objetivos Específicos

Capítulo 11. Esquema de Trabajo (archivo pdf, 33 kb)

Capítulo 12. Materiales y Métodos (archivo pdf, 355 kb)

  • 12.1 Cristalería
  • 12.2 Medio de cultivo, Cepas Bacterianas y Sobres Generadores de Microaerofília y Anaerobiosis
  • 12.3 Antibióticos, Concentraciones y Siembras
  • 12.4 Cepas y sus Plásmidos
  • 12.5 Incubación
  • 12.6 Preparación de las diferentes condiciones
  • 12.7 Aerobiosis
  • 12.8 Microaerofília
  • 12.9 Anaerobiosis
  • 12.10 Vacío
  • 12.11 Anaerobiosis + Vacío
  • 12.12 Curvas de Crecimiento

Capítulo 13. Resultados (archivo pdf, 702 kb)

  • 13.1 Evaluación y determinación del crecimiento de bacillus subtilis 832 silvestre en diferentes concentraciones de oxígeno y al vacío, calculando la velocidad de crecimiento (k) y el tiempo medio de generación (g)
  • 13.2 Evaluación del crecimiento de bacillus subtilis 832 pub110::vgb en diferentes concentraciones de oxígeno y al vacío, calculando la velocidad de crecimiento (k) y el tiempo medio de generación (g)
  • 13.3 Evaluación del crecimiento de bacillus subtilis 832 ptrp::vgb en diferentes concentraciones de oxígeno y al vacío, calculando la velocidad de crecimiento (k) y el tiempo medio de generación (g)
  • 13.4 Comparación de las cepas de b.subtilis en las diferentes concentraciones de oxígeno y vacío

Capítulo 14. Discusión (archivo pdf, 28 kb)

Capítulo 15. Conclusión (archivo pdf, 14 kb)

Capítulo 16. Perspectivas (archivo pdf, 13 kb)

Referencias (archivo pdf, 61 kb)

Apéndice A. 18.1 Plásmidos (archivo pdf, 28 kb)

Apéndice B. 18.1.1 Plásmido PTRP (archivo pdf, 12 kb)

Apéndice C. 18.1.2 Plásmido Pub11::SSPE::VGB (archivo pdf, 13 kb)

Apéndice D. 18.1.3 Tinción GRAM (archivo pdf, 6 kb)

Apéndice E. 18.2 Evaluación de condiciones de las tres cepas de B.Subtilis (archivo pdf, 7 kb)

Apéndice F. 18.2.1 Evaluación del crecimiento de Bacillus Subtilis832 PUB110::VGB en diferentes concentraciones de oxígeno y al vacío (archivo pdf, 7 kb)

Apéndice G. 18.2.2. Evaluación del crecimiento de Bacillus Subtilis832 PUB110::VGB en diferentes concentraciones de oxígeno y al vacío (archivo pdf, 6 kb)

Apéndice H. 18.3 Tablas de comparación (archivo pdf, 9 kb)

Apéndice I. 18.4 Fórmulas de análisis estadístico (archivo pdf, 42 kb)

Sánchez Quinto, A. 2010. Influencia del crecimiento de Bacillus subtilis conteniendo varias copias del gen vgb de Vitreoscilla stercoraria en diferentes concentraciones de oxígeno y a diferentes presiones. Tesis Licenciatura. Biología. Departamento de Ciencias Químico Biológicas, Escuela de Ciencias, Universidad de las Américas Puebla. Mayo. Derechos Reservados © 2010.