Resumen

El uso desmedido de los combustibles fósiles como principal herramienta de la industria y del transporte ha generado graves daños al medio ambiente. Las emisiones de gases tóxicos, el daño a la capa de ozono y la próxima extinción de los yacimientos de petróleo, han hecho necesaria la búsqueda de recursos energéticos sustentables. Considerando esta problemática, se ha planteado el desarrollo de biocombustibles como el biodiesel, el cual puede ser sintetizado de manera sencilla utilizando catalizadores químicos y enzimáticos. Algunas de las enzimas utilizadas como catalizadores son las lipasas, las cuales pueden hacer la transesterificación de ácidos grasos de cadena larga para producir glicerol y biodiesel.

A través del trabajo realizado, se logró la amplificación por PCR de las secuencias de dos posibles lipasas provenientes de Bacillus cereus y Pseudomonas aeruginosa. Posteriormente, se realizó un análisis in silico el cual permitió conocer la estructura general de las posibles enzimas, así como su potencial catalítico de acuerdo a sus dominios conservados.

De esta manera, se determinó que la secuencia de Bacillus cereus corresponde a una enzima con posible actividad carbohidrato esterasa. La secuencia tiene dominios conservados para la familia GDSL y SGNH lo que le da un alto potencial lipolítico. Por otra parte, la secuencia de la proteína de P. aeruginosa mostró una homología semiconservada con las enzimas tioesterasa y serín hidrolasa. Sin embargo, esta conservación no es suficiente para suponer que la actividad catalítica se mantenga. De forma general la enzima pertenece a la familia alpha/beta hidrolasa y tiene aminoácidos conservados que le confieren una posible actividad como lipasa.

Palabras clave: biodiesel, lipasas, enzimas, clonación, PCR.

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Huerta Guevara, A. P. 2012. Amplificación y análisis in silico de dos posibles lipasas de Bacillus cereus y Pseudomonas aeruginosa: búsqueda de enzimas de interés en la síntesis de biodiesel. Tesis Licenciatura. Bioquímica Clínica. Departamento de Ciencias Químico Biológicas, Escuela de Ciencias, Universidad de las Américas Puebla. Mayo. Derechos Reservados © 2012.