Resumen

Pseudomonas aeruginosa representa uno de los patógenos nosocomiales más importantes a nivel mundial. Gracias a sus diferentes mecanismos de virulencia y de resistencia la convierten en un blanco difícil de atacar. La resistencia a los antibióticos crece cada vez más, y es de vital importancia la búsqueda de nuevos compuestos antimicrobianos ya sean sintéticos o de origen natural que actúen de manera eficaz contra microorganismos patógenos multirresistentes como P. aeruginosa. Un antimicrobiano de origen natural que podría funcionar contra este tipo de bacterias son las denominadas bacteriocinas, péptidos producidos por diferentes grupos de bacterias con actividad antimicrobiana y de selectividad. El objetivo de este trabajo de investigación se basó en la búsqueda de compuestos antimicrobianos en P. aeruginosa con acción contra bacterias de la misma especie. Se utilizaron 16 cepas de P. aeruginosa, 3 de E. cloacae y diferentes cepas de E. coli, S. aureus, K. pneumoniae y C. albicans. Para comprobar la existencia de bateriocinas en P. aeruginosa y su actividad en bacterias tanto de la misma especie como de diferentes grupos, se utilizaron diferentes métodos de inhibición y aislamiento tales como inhibición por disco, liofilización, determinación de la concentración mínima inhibitoria, purificación por columna de separación y purificación por sulfato de amonio. De las 16 cepas de P. aeruginosa, se escogió una cepa multirresistente como productora de la bacteriocina con mayor actividad sobre las demás bacterias, después de los diferentes pasos de purificación y las pruebas realizadas, la inhibición presentada en 9 cepas de P. aeruginosa varió dependiendo de las purificaciones realizadas. Sin embargo, no aumentó categóricamente comparándola con el extracto crudo. Por otro lado, se obtuvo una inhibición real al utilizarla contra K. pneumoniae. Por lo que se concluye que la cepa más multirresistente fue la productora de la bacteriocina y probablemente haya más de una molécula con actividad antimicrobiana debido a que en los diferentes métodos de purificación se encontraron diferentes radios de inhibición en diferentes cepas. Así mismo, estas bacteriocinas podrían ser usadas contra bacterias de grupos diferentes aplicando métodos de purificación más especializados y cambiando su composición química o molecular podrían tener un espectro más amplio de acción.

SUMMARY. Pseudomonas aeruginosa represents one of the most important nosocomial pathogens in the world. Thanks to its different mechanisms of virulence and multi-resistance it is becoming more and more difficult to treat infections cause by this bacterium. The worldwide increasing resistance to antibiotics makes paramount the search of either synthetic or natural new antimicrobial compounds to treat infections caused by multi-resistant bacteria. Bacteriocins, a natural antimicrobial peptide produced by different groups of bacteria for selectivity could work as a potent antibiotic. The main aim of this research was to search for new antimicrobial compounds produced by P. aeruginosa that have an antimicrobial action against bacteria from the same species. There were used 16 different strains of P. aeruginosa, 3 of E. cloacae, and other strains of E. coli, S. aureus, K. pneumoniae, and C. albicans. To prove the existence of bacteriocins in P. aeruginosa and its activity against bacteria from the same and different groups and species, it was used different methods of inhibition and isolation like Kirby-Bauer inhibition method, liofilization, affinity chromatography, minimal inhibitory concentration, and ammonium sulfate precipitation. From the 16 strains of P. aeruginosa, we select one multi-resistant strain with bacteriocin production that inhibited the other strains. After all the isolation and purification methods apply, the bacteriocin inhibited 9 different strains of P. aeruginosa even though the results were different depending on the purification method, but it had a real inhibition ratio against K. pneumoniae. In conclusion, the most multi-resistant strain was the producer of the bacteriocin and probably there are more than one compounds with antimicrobial activity because there were found different inhibition ratios in different bacteria strains depending on the purification method. Also, these bacteriocins could be used against different bacteria groups using the results with K. pneumoniae, but they must be purified with specialized purification methods. Another application is the use of these bacteriocins in a large spectrum of bacteria modifying their chemical or molecular composition.

Palabras clave: Multirresistencia, antibióticos naturales, péptidos antimicrobianos, bacteria.

Índice de contenido

Portada (archivo pdf, 97 kb)

Agradecimientos (archivo pdf, 52 kb)

Índices (archivo pdf, 60 kb)

Glosario (archivo pdf, 36 kb)

Capítulo 3. Introducción (archivo pdf, 145 kb)

Capítulo 4. Justificación (archivo pdf, 76 kb)

Capítulo 5. Objetivos (archivo pdf, 85 kb)

Capítulo 6. Materiales y Métodos (archivo pdf, 13 mb)

Capítulo 7. Resultados (archivo pdf, 11 mb)

Capítulo 8. Discusión (archivo pdf, 96 kb)

Capítulo 9. Conclusiones (archivo pdf, 61 kb)

Referencias (archivo pdf, 98 kb)

Guzmán Pérez, S. 2017. Aislamiento de Bacteriocinas de Pseudomonas aeruginosa multirresistente. Tesis Licenciatura. Bioquímica Clínica. Departamento de Ciencias Químico Biológicas, Escuela de Ciencias, Universidad de las Américas Puebla. Diciembre. Derechos Reservados © 2017.